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實驗室常用檢測技術
發布時間:2017-11-29|編輯:悅洋生物

診斷試劑是動物疫病防控和獸醫科技發展的核心元素之一。經二十多年發展,歷經化學、酶、免疫測定和探針技術4次技術革命,獸用診斷試劑已跨越至新的臺階。世界衛生組織(WHO)為發展中國家基層醫療單位制定了“ASSURED”診斷試劑標準,即應具備靈敏(Sensitive)、特異(Spe-cific)、快速(Rapid)、穩定(Robust)、容易使用(User-friendly)、低價(Affordable)、無儀器(Equipment-free)、易儲運(Deliverable)等八項特質。

一、實驗室檢測的意義

 動物疫病監測是動物、動物產品質量的重要保證,由法定的機構和人員按國家規定的動物防疫標準,依法制定程序、方法和標準,對動物、動物產品及有關物品進行定期或不定期的檢查和檢測,并依據監測結果進行處理的一種措施。動物疫病監測離不開實驗室檢測技術,準確、快速的檢測結果可為國家制定動物疫病預防控制規劃和疫病預警提供科學的依據。

二、實驗室常用檢測技術

(一)組織病理學檢測技術

 利用病理學和免疫學技術,對染病組織進行切片觀察和免疫組化染色,開展對動物疫病病原的特異性診斷工作。包括病理學技術和免疫病理學技術。

1、病理學診斷技術。利用疫病引起的動物組織發生特征性的病變和基本病理變化對動物疫病進行診斷。

2、免疫病理學檢測技術。免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是免疫學與組織(細胞)化學相結合的一個分支學科,以免疫學的抗原、抗體反應為基礎,主要原理是用標記的抗原(或抗體)對細胞(組織)內的相應抗體(抗原)進行定性、定位或定量檢測,經過組織化學的呈色之后,用顯微鏡、電子顯微鏡、熒光顯微鏡觀察結果。

(二)血清學診斷技術

 血清學診斷技術是建立在抗原與相應抗體在體外發生特異性結合反應基礎上的檢測技術,隨著科學技術的不斷發展和提高,血清學抗體檢測新技術層出不窮,應用面也日益擴大。如病毒中和試驗、血凝和血凝抑制試驗、瓊脂凝膠擴散試驗、血清平板和試管凝集試驗、免疫膠體金層析技術、酶聯免疫吸附試驗等,這些試驗方法已被大多數實驗室熟練掌握應用。如布病采用平板或試管凝集試驗,禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制試驗,豬瘟和口蹄疫采用間接血凝試驗;采用 ELISA 試驗檢測禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫病,養殖場也可采用血凝試驗和免疫金標技術來檢測免疫抗體滴度,操作簡便快速,使抗體監測技術真正得以推廣 , 切實為動物疫病防控提供有力的幫助。

(三)分子生物學檢測技術

 利用分子生物學技術,建立對動物疫病病原基因的檢測方法,用于動物疫病特異性快速診斷和病原基因變異進行分析,及時準確掌握動物疫病分子流行病學動態,為疫病防治提供基因理論分析依據。在獸醫實驗室診斷中,聚合酶鏈反應(PCR)較為常用。它是一種體外快速擴增 DNA 的技術。通過 PCR可以簡便、快速地從微生物材料中通過體外擴增的方式活動大量特定的核酸,可用微量樣品的檢測。一個 PCR 反應一般只需 4 小時就可完成。熒光定量PCR的出現更是將基因的表達水品進行定量分析變成了現實,彌補了普通PCR只能定性、操作繁瑣、易交叉污染的缺點。

(四)病原學檢測技術

 運用現代微生物學和細胞培養技術,開展動物病毒、細菌、寄生蟲等致病性微生物的分離、培養和鑒定工作。在對被檢動物可能患有何種細菌性疫病做出初步診斷后,需要采取病料分離鑒定病原菌以便最后確診。此過程包括細菌分離與接種、細菌的培養、細菌的鑒定等。病毒分離與鑒定是病毒性疫病檢測、診斷和流行病學調查的重要方法之一。寄生蟲病的檢測方法和其它傳染病的檢測有一定的區別,由于其獨特的發育史,決定了其檢測方法的特殊性。除了一般的流行病學調查和臨診檢查外,其定性的實質性方法有蟲卵檢查法、蟲體檢查法、免疫學檢測方法、分子生物學檢測方法。


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