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实验室常用检测技术
发布时间:2017-11-29|编辑:悦洋生物

诊断试剂是动物疫病防控和兽医科技发展的核心元素之一。经二十多年发展,历经化学、酶、免疫测定和探针技术4次技术革命,兽用诊断试剂已跨越至新的台阶。世界卫生组织(WHO)为发展中国家基层医疗单位制定了“ASSURED”诊断试剂标准,即应具备灵敏(Sensitive)、特异(Spe-cific)、快速(Rapid)、稳定(Robust)、容易使用(User-friendly)、低价(Affordable)、无仪器(Equipment-free)、易储运(Deliverable)等八项特质。

一、实验室检测的意义

 动物疫病监测是动物、动物产品质量的重要保证,由法定的机构和人员按国家规定的动物防疫标准,依法制定程序、方法和标准,对动物、动物产品及有关物品进行定期或不定期的检查和检测,并依据监测结果进行处理的一种措施。动物疫病监测离不开实验室检测技术,准确、快速的检测结果可为国家制定动物疫病预防控制规划和疫病预警提供科学的依据。

二、实验室常用检测技术

(一)组织病理学检测技术

 利用病理学和免疫学技术,对染病组织进行切片观察和免疫组化染色,开展对动物疫病病原的特异性诊断工作。包括病理学技术和免疫病理学技术。

1、病理学诊断技术。利用疫病引起的动物组织发生特征性的病变和基本病理变化对动物疫病进行诊断。

2、免疫病理学检测技术。免疫组织化学又称免疫细胞化学,是免疫学与组织(细胞)化学相结合的一个分支学科,以免疫学的抗原、抗体反应为基础,主要原理是用标记的抗原(或抗体)对细胞(组织)内的相应抗体(抗原)进行定性、定位或定量检测,经过组织化学的呈色之后,用显微镜、电子显微镜、荧光显微镜观察结果。

(二)血清学诊断技术

 血清学诊断技术是建立在抗原与相应抗体在体外发生特异性结合反应基础上的检测技术,随着科学技术的不断发展和提高,血清学抗体检测新技术层出不穷,应用面也日益扩大。如病毒中和试验、血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶扩散试验、血清平板和试管凝集试验、免疫胶体金层析技术、酶联免疫吸附试验等,这些试验方法已被大多数实验室熟练掌握应用。如布病采用平板或试管凝集试验,禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制试验,猪瘟和口蹄疫采用间接血凝试验;采用 ELISA 试验检测禽流感、猪瘟、口蹄疫等疫病,养殖场也可采用血凝试验和免疫金标技术来检测免疫抗体滴度,操作简便快速,使抗体监测技术真正得以推广 , 切实为动物疫病防控提供有力的帮助。

(三)分子生物学检测技术

 利用分子生物学技术,建立对动物疫病病原基因的检测方法,用于动物疫病特异性快速诊断和病原基因变异进行分析,及时准确掌握动物疫病分子流行病学动态,为疫病防治提供基因理论分析依据。在兽医实验室诊断中,聚合酶链反应(PCR)较为常用。它是一种体外快速扩增 DNA 的技术。通过 PCR可以简便、快速地从微生物材料中通过体外扩增的方式活动大量特定的核酸,可用微量样品的检测。一个 PCR 反应一般只需 4 小时就可完成。荧光定量PCR的出现更是将基因的表达水品进行定量分析变成了现实,弥补了普通PCR只能定性、操作繁琐、易交叉污染的缺点。

(四)病原学检测技术

 运用现代微生物学和细胞培养技术,开展动物病毒、细菌、寄生虫等致病性微生物的分离、培养和鉴定工作。在对被检动物可能患有何种细菌性疫病做出初步诊断后,需要采取病料分离鉴定病原菌以便最后确诊。此过程包括细菌分离与接种、细菌的培养、细菌的鉴定等。病毒分离与鉴定是病毒性疫病检测、诊断和流行病学调查的重要方法之一。寄生虫病的检测方法和其它传染病的检测有一定的区别,由于其独特的发育史,决定了其检测方法的特殊性。除了一般的流行病学调查和临诊检查外,其定性的实质性方法有虫卵检查法、虫体检查法、免疫学检测方法、分子生物学检测方法。


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